Introdução à Microbiologia, Genética Microbiana e Tecnologia de DNA Recombinante
Objetivos
Aquisição de conceitos básicos em genética microbiana e tecnologia e aplicações do DNA recombinante; manipulação de culturas bacterianas, isolamento de DNAs e RNAs e sua análise, super-produção de proteínas e microscopia.
Caracterização geral
Código
10116
Créditos
6.0
Professor responsável
Adriano Oliveira Henriques
Horas
Semanais - 4
Totais - 64
Idioma de ensino
Português
Pré-requisitos
A disponibilizar brevemente
Bibliografia
Livros e artigos de revisão recomendados pelos docentes:
1. Griffiths, A.J.F., Susan R. Wessler, Richard C. Lewontin, Sean B. Carroll. 2007. Introduction to Genetic Analysis. Publisher: W. H. Freeman. ISBN-13: 978-0716768876
2. - Snyder, L. and Champness, W. 2003. Molecular Genetics of Bacteria. American Society for Microbiology. Washington, D.C. ISBN: 1-55581- 204 - X
O Mundo do RNA" Novos desafios e perspectivas futuras, Coordenação Cecília M. Arraiano e Arsénio M. Fialho, Editora Lidel 2007, cap 7 sobre ribonucleases e degradação do RNA, e parte do cap 13 sobre peq RNAs e RNomics.
Silva IJ, Saramago M, Dressaire C, Domingues S, Viegas SC, Arraiano CM. Importance and key events of prokaryotic RNA decay: the ultimate fate of an RNA molecule. Wiley Interdiscip Rev RNA. 2011 Nov;2(6):818-36. doi: 10.1002/wrna.94. Epub 2011 Jul 6.
Viegas SC, Arraiano CM. Regulating the regulators: How ribonucleases dictate the rules in the control of small non-coding RNAs. RNA Biol. 2008 Oct-Dec;5(4):230-43. Epub 2008 Oct 3. Review.
Método de ensino
Ensino prático e laboratorial; resolução de problemas; orientação tutorial, estudo e exame
Método de avaliação
A disponibilizar brevemente
Conteúdo
Biologia Molecular Bacteriana; estrutura e replicação do cromossoma; divisão celular. Expressão génica: estrutura e função do RNA, transcrição, tradução, “folding” das proteínas. Transferências génicas: plasmídeos, recombinação, conjugação, transformação, transdução generalizada e especializada. Análise genética: mutação; isolamento e selecção de mutantes; reversão e supressão; recombinação e complementação; mapeamento genético. DNA Recombinante: endonucleases de restrição, sistemas de restrição e de modificação, mapeamento físico, RFLPs, clonagem molecular, vectores, bibliotecas de DNA, aplicações (sequenciação; super-produção de proteínas, mutagénese dirigida, aplicações em biotecnologia e biomedicina). Reacção em cadeia da polimerase (PCR): bases e utilizações da técnica de PCR. Metodologias para o estudo da função dos genes: mutagénese in vitro e substituição alélica, genética reversa, transposição; fusões génicas, genes repórter, marcadores da localização sub-celular, marcadores topológicos; mapeamento de domínios funcionais, interacções proteína-proteína. Genómica funcional e proteómica: pós-genómica, genómica comparativa, metagenómica. Aspectos essenciais da regulação da expressão génica: controlo transcricional e pós-transcricional, controlo de qualidade, interacções proteína ácidos-nucleicos, nucleases, riboswitches, pequenos RNAs e RNAs antisense, regulação da tradução e proteólise.